Загальний білок

Плазму крові, ексудати і транссудату можна використовувати як біологічного матеріалу. Всі вони дають порівнянні результати, хоча через присутність фібриногену рівень загального білка в плазмі крові на 2-4 г / л вище, ніж у сироватці. Білок стабільний у сироватці та плазмі крові протягом тижня при кімнатній температурі, принаймні до 2 міс при -20 ° С. Гемоліз дає хибнопозитивні збільшення загального білка на 3% на кожен 1 г вільного гемоглобіну в 1 л сироватки крові.

Вміст загального білка у чоловіків і жінок у середньому складає 66-81 г / л. Результати для чоловіків приблизно на 1 г / л вище, ніж для жінок. При вагітності концентрація білка в сироватці крові помітно зменшується – з 69 до 61 г / л до моменту пологів. Не відмічено відмінностей в концентрації білка сироватки до і після їжі.

Фізіологічні коливання вмісту загального білка в сироватці крові залежать в більшості випадків від зміни обсягу рідкої частини крові і в меншій мірі пов’язані з синтезом або втратою білка. У нормі вміст білка в сироватці крові однаково як у вегетаріанців, так і у людей зі звичайним характером харчування, хоча навантаження білком може збільшити в крові вміст загального білка. Висока фізична активність сприяє тільки незначного підвищення в крові вмісту загального білка.

Гипопротеинемия. Деяке зменшення концентрації загального білка в сироватці крові відбувається з віком. У новонароджених концентрація білка в сироватці крові становить 57 г / л, збільшується до 60 г / л до 6 міс і досягає рівня у дорослих до 3 років життя. У недоношених дітей вміст може бути нижчою, ніж у народжених в строк (36-60 г / л). Зміна положення тіла дає значуща відмінність в концентрації білка сироватки крові. Загальний білок сироватки крові нижче на 4-8 г / л у людей в положенні лежачи, ніж у людей в положенні стоячи. Вміст білка може бути збільшено на 4-8 г / л через кілька годин після фізичних навантажень.

Вміст білка в сироватці крові спочатку залежить від синтезу в печінці і втрати білків з сечею при захворюваннях нирок. Деяке зниження вмісту білка може бути викликано недостатнім надходженням з їжею, порушеннями травлення, всмоктування. Хронічні захворювання печінки також зменшують рівень загального білка в сироватці крові. Захворювання нирок (гломерулонефрит, нефротичний синдром і деякі захворювання проксимальних

канальців) можуть викликати хронічну втрату білка з сироватки крові. Коли вміст загального білка в сироватці крові знижується до 40 г / л, розвиваються набряки.

Гіперпротеїнемія. Збільшення загального білка в сироватці крові може бути викликане явищами дегідратації або бути результатом накопичення імуноглобулінів; Останнім часто спостерігають у пацієнтів з моноклональній гаммапатіей.

На концентрацію білків у плазмі крові сильно впливає вміст у плазмі крові води (величина гематокриту). В інших ситуаціях визначення загального білка в сироватці крові не дозволяє провести органотопіческую діагностику, однак широко використовується при скринінгу і профілактичних оглядах. Зниження вмісту білків в плазмі крові далеко не завжди відображає порушений білковий обмін.

Методи визначення

Ідеальним для визначення загального білка був би метод, що не залежить від виду білка. Проте в даний час за допомогою всіх методичних прийомів визначення вмісту загального білка в сироватці крові зі значно більшою аналітичною чутливістю і специфічністю встановлюють концентрацію домінуючого виду білка. Крім того, деякі білки в крові пов’язані з ліпідами і вуглеводами, що також накладає відбиток на методи їх кількісного визначення. Особливість загального білка як обумовленого з’єднання – його виражена гетерогенність вже у фізіологічних умовах, яка стає більш вираженою при різних видах патології.

Найбільш часто використовуваний для визначення загального білка в сироватці метод заснований на биуретовой реакції. У ній іони міді взаємодіють з атомами азоту пептидного зв’язку білка. Утворений комплекс реагує з Біурета (карбамілмочевіной) в сильно лужному середовищі (зазвичай NaOH) з утворенням забарвленого в бузковий колір продукту конденсації з максимальною абсорбцією при довжині хвилі 450 нм.

Метод Лоурі і співавт., Широко використовуваний для кількісного визначення білка, може бути застосований і для аналізу загального білка сироватки крові. У цьому методі білок в пробі попередньо обробляють лужним розчином міді. Після додавання фенолового реактиву при зв’язуванні мідно-білкового комплексу з тирозином і

триптофаном в ланцюгах білкових молекул утворюється хромоген з максимумом абсорбції при довжині хвилі 745-750 нм. Цистин, цистеїн і гістидин також реагують в цих умовах, але в меншому ступені.

Багато білки сироватки та плазми крові визначають при використанні більш специфічних методів (реакція Аг-АТ) або виражають у формі каталітичної концентрації. Найчастіше в діагностиці використовують кількісні параметри білків і значно рідше визначають порушення їхніх якісних параметрів. Це відноситься до генетичних порушень первинної структури білкових молекул.

Електрофорез (ЕФ) – найбільш поширений метод оцінки якісного складу білків сироватки крові. Володіючи різними зарядом, білки в буферному розчині рухаються в електричному полі до анода зі швидкістю, пропорційної величині їх негативного заряду. Використання одного з носіїв, частіше ацетату целюлози, застосування буферної системи з постійними рН та іонної силою, оптимізація параметрів електричного поля і часу разгонки дозволяють стандартизувати процедуру ЕФ і отримувати відтворювані результати.

Посилання на основну публікацію