Особливості біотехнології культивування вірусів

Віруси є облігатними внутрішньоклітинними мікроорганізмами, тому на штучних поживних середовищах вони не ростуть. Для культивування вірусів використовують 3 живі системи:

  • 1. Чутливі тварини.
  • 2. Курячі ембріони.
  • 3. Культури клітин.

При лабораторному культивуванні вірусів використовують культури клітин, що ростуть на поверхні стінок тих чи інших ємностей (матрацах).

У великомасштабному виробництві використовують метод вирощування суспензійних клітинних культур. Цей метод вперше описав в 1953 р Оуенс. Він показав здатність клітин розмножуватися в рідкому середовищі у вільному суспендованих стані. Клітини перевіваемих ліній можуть довго культивуватися в підвішеному стані. У таких умовах клітини розмножуються, не прикріплений до стінок культурального судини, завдяки постійному перемішуванню середовища. Перемішування суспензійний культур проводять лопатевими і магнітними мішалками, а також круговими гойдалками.

В даний час зазначена клітинна система широко використовується в вірусологічних дослідженнях для накопичення великих кількостей віруссодержащего матеріалу при виготовленні вакцин, т. К. При оптимальному режимі вирощування клітини в суспензіях швидко розмножуються і дають вищий «урожай», ніж у стаціонарних культурах.

Суспензійні культури готують з одношарових клітинних культур. Клітини знімають зі скла за допомогою розчинів версії і трипсину. Осад клітин після центрифугування ресуспендіруют у свіжій ростовой живильному середовищі. Приготовану суспензію поміщають в культуральні судини, реактори, ферментери і вирощують при постійному і інтенсивному перемішуванні. Це робиться для того, щоб підтримувати клітини в підвішеному стані, перешкоджати їх осадження і прикріплення до стінок посудини і в той же час не викликати їх механічного пошкодження. Спосіб суспензійного вирощування клітин в біологічній промисловості став застосовуватися порівняно недавно.

Навіть за короткий термін отримані вражаючі результати. Великі успіхи досягнуті при отриманні суспензійних постійних культур клітин ВНК-21 для вирощування вірусу ящура, вірусу сказу клітин нирки поросят JBRS-2 для розмноження вірусу ящура, вірусу везикулярного хвороби свиней та ін.

Вирощування клітинних культур здійснюють у спеціальних реакторах ємністю 1000 і більше літрів при температурі 36-37 ° С, рН 7,4 і безперервному перемішуванні суспензії клітин при 300-350 об / хв.

Незважаючи на досягнення з вирощування суспензійних клітинних культур, на багатьох підприємствах біологічної промисловості частіше використовуються методи отримання клітинних ліній в стані спокою або Ролерні (динамічним) способом.

Посилання на основну публікацію