Методи оцінки імунного статусу

Для виявлення імунодефіцитних станів виникає необхідність оцінки показників функціональної активності імунної системи, тобто імунного статусу.

Оцінка імунного статусу складається з декількох етапів:
• Клініко-лабораторний етап, який включає в себе:
– Збір та оцінку імунологічного анамнезу (частота інфекційних захворювань, характер їх перебігу, вираженість температурної реакції, наявність осередків хронічної інфекції, реакції на вакцинацію або введення лікарських засобів);
– Оцінку результатів загального клінічного аналізу крові (вміст гранулоцитів, моноцитів, лімфоцитів);
– Виявлення за допомогою бактеріологічних, вірусологічних та / або серологічних досліджень бактерионосительства і вирусоносительства.
• Лабораторно-імунологічний етап.

На цьому етапі в імунологічної лабораторії проводяться дослідження, метою яких, власне, і є якісна і кількісна оцінка функціональної активності імунної системи (іммуннокомпетентних клітин). Для цього розроблено ряд (набір) тестів, які ділять на тести 1-го (орієнтовного) і 2-го (аналітичного) рівнів.
Тести 1-го рівня є орієнтовними і дозволяють виявити грубі порушення діяльності імунної системи. Вони включають в себе визначення:

– Загального та відносного числа лімфоцитів,
– Основних субпопуляцій (Т-і В-клітини),
– Фагоцитарної активності лейкоцитів,
– Концентрації імуноглобулінів різних класів в сироватці крові.
Загальне (абсолютне) і відносне число лімфоцитів визначають за даними клінічного аналізу крові. Зміст Т-і В-лімфоцитів підраховують в реакції імунофлюоресценції, використовуючи мічені моноклональні флюоресцирующие сироватки до специфічних поверхневих антигенів маркерами, що позначається символами CD (claster differentiation). Таких антигенних маркерів відомо кілька десятків, але окремі з них характерні для того чи іншого типу клітин:

• рецептор CD3 – це рецептор всіх Т-лімфоцитів,
• рецептори CD19, 20, 21, 72 – В-лімфоцитів,
• рецептори CD4 – Т-хелпери,
• рецептори CD8 – Т-супресори,
• рецептори CD16 – NK-клітини (натуральні кілери).

Більш доступним і простим, але менш точним і застарілим є метод розеткоутворення. Він заснований на тому, що В-лімфоцити можуть адсорбувати на своїй поверхні еритроцити мишей, а Т-лімфоцити – еритроцити барана (їх також можуть утворювати NK-клітини). Лімфоцит з прилиплими до нього еритроцитами – це і є розетка, їх підраховують в забарвлених за Романовським-Гімзою мазках із суміші лімфоцитів і відповідних еритроцитів.

Для оцінки фагоцитарної активності нейтрофілів крові визначають відсоток фагоцитуючих клітин і фагоцитарний показник (середня кількість мікробних клітин, поглинених одним лейкоцитів).
Концентрацію (рівень) імуноглобулінів різних класів G, М, А і Е в сироватці крові визначають у реакції преципітації в гелі (радіальна іммунодіффузія по Манчіні) з антіглобуліновой сироватками до Ig G, Ig M, IgA, Ig E, але цей метод має досить велику помилку при визначенні ± 15%.

Тести 2-го рівня дозволяють провести більш глибокий аналіз стану імунної системи та уточнити характер дефектів, виявлених за допомогою тестів 1-го рівня. До них відносяться, наприклад, визначення окремих субклассов імуноглобулінів (особливо Ig G, секреторного Ig A) і В-лімфоцитів, регуляторних та ефекторних клітин.

Крім того, за допомогою імуноферментних та радіоімунних методів можна визначити концентрації окремих цитокінів – головних регуляторних молекул, що визначають тип імунної відповіді. Наприклад, інтерлейкін-2 є обов’язковим компонентом імунної відповіді на будь-які антигени, в тому числі і мікробні, так як забезпечує проліферацію та диференціювання Т-лімфоцитів.

Посилання на основну публікацію