Методи мікробіологічної діагностики

Аналітичний етап включає мікроскопічний, культуральний, біологічний, серологічний і алергологічний методи мікробіологічної діагностики.

Мікроскопічний метод полягає у приготуванні препаратів (нативних або забарвлених простими або складними методами) з досліджуваного матеріалу і їх мікроскопії із застосуванням різних видів мікроскопічної техніки (світлова, темнопольна, фазово-контрастна, люмінесцентна, електронна та ін.). У бактеріології мікроскопічний метод отримав назву бактериоскопического, у вірусології – вірусоскопіческого.

Культуральний метод полягає в посіві досліджуваного матеріалу на штучні живильні середовища, культури клітин або курячі ембріони з метою виділення та ідентифікації чистої культури збудника або збудників. У бактеріології культуральний метод отримав назву бактеріологічного, в мікології – микологического, в протозоології – протозоологіческого, у вірусології – вірусологічного.

Біологічний метод (експериментальний або біопроба) полягає у зараженні досліджуваним матеріалом чутливих лабораторних тварин або інших біологічних об’єктів (курячі ембріони, культури клітин). Його використовують для виділення чистої культури збудника, визначення типу токсину, активності антимікробних хіміотерапевтичних препаратів і т.д.

Серологічний метод полягає у визначенні титру специфічних антитіл у сироватці крові хворого, рідше – у виявленні мікробного антигену в досліджуваному матеріалі. З цією метою використовуються імунні реакції.

Алергологічний метод полягає у виявленні інфекційної алергії (ГЗТ) на діагностичний мікробний препараталлерген. З цією метою ставлять шкірні алергічні проби з відповідними алергенами.

Діагностична цінність цих методів нерівнозначна. Провідним методом мікробіологічної діагностики є бак- теріологічне метод, так як він дозволяє виділяти і іден- тіфіціровать мікроб-збудник, тобто першопричину хвороби. Решта методів менш інформативні, оскільки вони дозволяють виявити в організмі зміни, зумовлені наявністю в ньому мікроба. Друге місце за значимістю займає серологічний метод, оскільки взаємодія антигену і антитіла характеризується високим ступенем специфічності. Інформативність трьох інших методів невисока, і вони зазвичай служать доповненням до бактеріологічному і серологічного методів. Так, мікроскопія досліджуваного матеріалу далеко не завжди дозволяє побачити та ідентифікувати мікроби під мікроскопом. Їх вдається виявити тільки при високій обсіменіння ними матеріалу. Навіть виявивши бактерії під мікроскопом, ідентифікувати їх до виду морфологічно не можна. Як відомо, всі видове різноманіття бактерій зводиться до 4 основним морфологічним формам: коки, палички, покручені і розгалужені форми. Тому по мікроскопічною картиною можна досить орієнтовно віднести побачені бактерії до великого таксону, наприклад грампозитивних коків. Тільки в поодиноких випадках, коли бактерії мають унікальну морфологію, мікроскопічно можна визначити їх родову приналежність. Інформативність мікроскопічного методу грибів і найпростіших вище, так як гриби та найпростіші, будучи еукаріотами, мають більші розміри і більш характерну морфологію.

Діагностичні можливості біологічного методу обмежені тим, що до більшості збудників антропонозних инфек- ций людини лабораторні тварини несприйнятливі, тому викликати у них експериментальну інфекцію не представляється можливим.

Можливості алергологічного методу обмежені тим, що більшість мікробів в організмі людини не викликають ГЗТ.

Оскільки мікробіологічні дослідження є одним з найбільш дорогих видів лабораторних досліджень, перед ми- кробіологом стоїть завдання постановки достовірного мікробіологічного діагнозу з найменшою витратою часу, сил і засобів. Тому для постановки діагнозу використовують 1-5 методів діагностики, щоб обраний набір методів гарантував правильність відповіді.

Особливого значення набувають методи експрес-діагностики, які дозволяють поставити мікробіологічний діагноз протягом короткого проміжку часу (від декількох хвилин до декількох годин) з моменту доставки досліджуваного матеріалу в лабораторію. До числа експрес-методів відносяться РИФ, ІФА, РІА, ПЛР, використання биочипов, хроматографія та ін. Особливості діагностики анаеробних інфекцій викладені в матеріалах диска.

Поряд з традиційними класичними методами мікробіологічної діагностики в останні роки все більшого значення набувають молекулярно-біологічні методи діагностики (ДНК-зонди, ПЛР, лігазная ланцюгова реакція – ЛЦР, хроматографія, електрофорез, імуноблот, біочіпи та ін.).

Молекулярно-біологічні методи діагностики засновані на ідентифікації ДНК і РНК, специфічних для даного виду мікробів, і включають гібридизацію на основі ДНК-зондів і діагностику на основі ПЛР.

Постаналітіческой етап мікробіологічної діагностики полягає в клінічної інтерпретації результатів лабораторних досліджень. При цьому лікар повинен оцінити етіологічнезначення виділених від хворого мікробів, скорегувати на підставі даних мікробіологічного моніторингу проведену хворому емпіричну антимікробну хіміотерапію та ін.

Посилання на основну публікацію