1. Моя освіта – реферати, конспекти, доповіді
  2. Біологія
  3. Метод напилення

Метод напилення

Метод напилення особливо зручний, коли цікавлять дослідника частинки або цілі клітини поміщені на поверхні пластикової підтримуючої плівки. Об’єкти, досліджувані за допомогою даного методу (наприклад, вірусні частки, які з цією метою розпилюють на поверхню плівки і потім висушують), поміщають в безпосередній близькості від розпеченої платинової спіралі (напилення проводиться в умовах глибокого вакууму). Метал спіралі, випаровуючись, осідає на поверхні плівки. Оскільки пучок атомів падає на зразок під невеликим кутом, атоми платини осідають переважно на поверхні, зверненої до спіралі; поверхню же частинок, що знаходиться як би в»тіні», залишається при цьому майже зовсім непокритою металом. При спостереженні напилених препаратів в електронному мікроскопі просторова організація досліджуваного об’єкта виявляється з дуже високою чіткістю.

Зовсім недавно почав застосовуватися новий метод – метод заморожування- травлення. У цьому випадку досліджують зрізи об’єкту, замороженого до дуже низької температури (-100 ° С). Очевидно, що зрізи в цьому випадку не»ріжуть», а сколюють. При ударі ножа утворюється тріщина, що проходить через найслабші точки структури. Наприклад, клітина часто сколюється уздовж поверхні ядерної мембрани, оголюючи при цьому внутрішній вміст ядра. Після сколювання об’єкт поміщають у вакуум і випаровують з поверхні відколу деяка кількість води.

Ця (протравлена ) поверхня потім піддається напиленню платиною, що проводиться способом, який ми описували вище. На заключній стадії приготування препарату біологічний об’єкт видаляють за допомогою ряду ферментів, в результаті чого залишається лише металева репліка досліджуваної поверхні. Ці репліки потім фотографують в електронному мікроскопі звичайним способом. Оскільки будова заморожених клітин найближче до»нативному», метод заморожування- травлення, повідомимо, дозволяє одержати досить гарне зображення інтактних структур клітини, хоча на перший погляд може здатися, що властивості платинового»відбитка»мають бути досить далекі від властивостей живої клітини.

ПОДІЛИТИСЯ: