Цитопатична дія вірусів

Про розмноження вірусів у культурі тканини можна судити по цитопатичної дії (ЦПД):

деструкції клітин,
зміни їх морфології,
формуванню багатоядерних симпластів або сінтіція в результаті злиття клітин.
в клітинах культури тканини при розмноженні вірусів можуть утворюватися включення – структури, не властиві нормальним клітинам.
Включення виявляються в забарвлених за Романовським-Гімза мазках із заражених клітин. Вони бувають еозинофільні і базофільні.
По локалізації в клітині розрізняють:
цитоплазматические,
ядерні,

змішані включення.
Характерні ядерні включення формуються в клітинах, заражених вірусами герпесу (тільця Каудрі), цитомегалії і поліоми, аденовірусами, а цитоплазматичні включення – вірусами віспи (тільця Гварніері і Пашена), сказу (тільця Бабеша-Негрі) та інші.

Про розмноження вірусів у культурі тканини також можна судити за методом «бляшок» (негативних колоній). При культивуванні вірусів в клітинному монослое під агаровим покриттям на місці уражених клітин утворюються зони деструкції Моносем. Так звані «стерильні плями», або бляшки. Це дає можливість не тільки визначити число віріонів в 1 мл середовища (вважається, що одна бляшка є потомство одного віріона), а й диференціювати віруси між собою по феномену бляшкообразрованія.
Наступним методом, що дозволяє судити про розмноження вірусів (тільки гемагглютинирующих) в культурі тканини, можна вважати реакцію гемадсорбції. При культивуванні вірусів, що володіють гемагглютінірующей активністю, може відбуватися надлишковий синтез гемагглютининов. Ці молекули експресуються на поверхні клітин культури тканини, і клітини культури тканини набувають здатність адсорбувати на собі еритроцити – феномен гемадсорбції. Молекули гемаглютиніну накопичуються і в середовищі культивування, це призводить до того, що культуральна рідина (в ній накопичуються нові віріони) придбає здатність викликати гемаглютинацію.

Найбільш поширеним методом оцінки розмноження вірусів у культурі тканини є метод «кольорової проби». При розмноженні в живильному середовищі з індикатором незаражених клітин культури тканини внаслідок утворення кислих продуктів метаболізму вона змінює свій колір. При репродукції вірусу нормальний метаболізм клітин порушується, кислі продукти не утворюються, середа зберігає початковий колір.

Посилання на основну публікацію