Вплив мутацій srm на мітотичну стабільність рекомбінантних плазмід

Мутація srml приблизно вдвічі знижує темп спонтанної втрати дріжджовими клітинами кільцевих мініхромосом, що містять елемент ARS1 і послідовності CEN, тоді як мутація cdc28-srm підвищує цей темп теж приблизно вдвічі.

Якісно подібне вплив надавали згадані 2 мутації на підтримку клітинами бесцентромерноі кільцевої плазміди pTl (ARS1 TRPI). Мабуть, вплив мутацій srml і cdc28-srm на підтримку кільцевих мініхромосом може бути опосередковано НЕ через цис-активні центромерная послідовності.

Мутації srml і cdc28-srm не чинили впливу на мітотичну стабільність плазмід YEpl3 і pYF91, несучих ori 2 | Jm ДНК. Очевидно, механізм, що забезпечує відносно високу мітотичну стабільність плазмід з ДНК і залежний від функцій, що кодуються цієї ендогенної плазміди, не залежить скільки-небудь значно від генів SRM1 і CDC28.

Нарешті, мутації srml і cdc28-srm викликали помітне підвищення початково дуже низькою мітотичної стабільності бесцентромерних плазмід з різними хромосомними елементами ARS. Мабуть, відповідні два гена беруть участь в механізмах, що визначають ефективність реплікації кільцевих рекомбінантних плазмід і / або асиметричну передачу бесцентромерних плазмід при діленні клітин. Було також вивчено вплив інших мутацій srm на мітотичну стабільність кільцевої мініхромосоми YCp50 (CEN4 ARS I) і бесцентромерной кільцевої плазміди YRpl2 (ARS1). Зазначеними плазмидами трансформували клітини спеціально сконструйованих близькоспоріднених мутантних і немутантів урацілзавісімих гаплоїдних штамів-реципієнтів.

Для кожної з чотирьох груп МТО-мутантних трансформантів, що мають нормальний мітохондріальний геном, в порівнянні з групою трансформантов SRM + rho +, мітотична стабільність кільцевої мініхромосоми YCp50 виявляється зниженою. Зниження митотической стабільності бесцентромерной плазміди YRpl2 виявляється у мутантів srml2, srml5, srml 7. Очевидно, гени SRM8, SRM 12, SRM15 і SRM 17, подібно генам SRM1 і CDC28, беруть участь в підтримці дріжджовими клітинами кільцевих рекомбінантних плазмід, що містять хромосомний елемент ARS.

...
ПОДІЛИТИСЯ: