Картування тонкої структури гена

Картування тонкої структури гена у вищих еукаріотів виконувалося на дрозофілі, внаслідок легкості культивування мух і малої тривалості їх генерації. Детально досліджено цистрон rosy (ry) – структурний ген, відповідальний за синтез ксантиндегідрогенази (КДГ).

Мухи, які не мають цього ферменту в активній формі (нуль-активні мутанти), легко визначаються по червонувато-коричневого кольору очей, що виникає через відсутність пігменту ізоксантоптеріна. Личинки, у яких відсутній КДГ, чутливі до дії пурину, який додається в корм. Таким чином, використання корму з пурином може служити методом виділення рідкісних рекомбінантов дикого типу при схрещуванні носіїв різних КДГ нуль-гетероаллелей. Самки, гетерозиготні за двома гетероаллелям rosy (ryx / ryy) у схрещуються з самцями, гетерозиготних за двома іншими гетероаллелям цього гена (rtf / rtf).

Оскільки у самців дрозофіли рекомбінація не спостерігається, то гетерозиготи дикого типу можуть з’являтися в потомстві лише внаслідок рекомбінації між Гух і ГУУ і володіти одним з двох можливих генотипів: гу + / гуа або гу + / ГУВ, активність КДГ яких забезпечує їх стійкість до пурину. Частина потомства, гетерозиготна по гетероаллелям rosy, гине від пурину. Підраховуючи частоту виникають гетерозигот дикого фенотипу, стійких до пурину, можна встановити частоту рекомбінації і визначити взаємне положення мутацій усередині гена. Роздільна здатність генетичного аналізу на основі описаного експерименту можна порівняти з досяжною роздільною здатністю в генетиці фагів і мікроорганізмів.

Паліндром, або Паліндромна послідовність, являє собою звернений повтор, тобто нуклеотидні послідовності замикаються самі на себе і утворюють структури, схожі на шпильки. Вони володіють обертальної симетрією другого порядку і тому в обох напрямках читаються однаково. Широко поширені короткі паліндроми, що представляють собою області впізнавання для рестриктаз і багатьох регуляторних білків.

...
ПОДІЛИТИСЯ:

Дивіться також:
Спрага